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人(PABPC1L)檢測試劑盒儲存條件

人(PABPC1L)檢測試劑盒儲存條件

產品時間:2026-04-16

簡要描述:

人(PABPC1L)檢測試劑盒儲存條件胞漿多聚A結合蛋白1樣蛋白(PABPC1L)是一種與多聚A結合蛋白1(PABPC1)相關的蛋白質,然而,從我搜索到的資料中,我們沒有直接找到關于PABPC1L的具體信息,因此,以下內容主要基于對PABPC1的已知功能和特性進行推測。

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人(PABPC1L)檢測試劑盒儲存條件
簡介  
胞漿多聚A結合蛋白1樣蛋白(PABPC1L)是一種與多聚A結合蛋白1(PABPC1)相關的蛋白質,然而,從我搜索到的資料中,我們沒有直接找到關于PABPC1L的具體信息,因此,以下內容主要基于對PABPC1的已知功能和特性進行推測

檢測原理

本試劑盒采用雙抗體夾心法ELISA技術:將捕獲抗體包被于酶標板上,捕獲樣品及標準品中的待測物PABPC1L,清洗后,再加入抗體標記的檢測抗體進行孵育后清洗,形成“捕獲抗體-抗原-檢測抗體"免疫復合物,隨后加入鏈霉親和素偶聯的辣根過氧化物酶進行孵育,待孵育結束后清洗,接著加入TMB顯色后,若樣本中有待測物則顯藍色,加入終止液停止反應。檢測過程中游離的成分均被洗去,用酶標儀在450 nm處測OD值,顏色的深淺和樣品中的待測物的含量呈正比,通過繪制標準曲線計算出樣本中PABPC1L的濃度。

操作要點

1. 混合蛋白質溶液時,應始終避免起泡。為了避免交叉污染,在添加每個標準品、樣品和試劑時應更換移液器槍頭。此外,每種試劑應單獨使用容器。

2. 確保試劑不間斷地添加到板孔中。為了確保準確的結果,在孵育步驟中需要粘合好封板膜。

3. 當使用自動洗板機時,在加入洗滌緩沖液后加入30秒的浸泡期,或者在洗滌步驟之間將板旋轉180度,可以提高測定精度。

4. 顯色劑應保持無色,直到添加到板中。確保顯色劑不受光線照射。顯色劑應從無色變為藍色。

5. 應按照與顯色劑相同的順序將終止液添加到板中。加入終止液后,孔中形成的顏色將從藍色變為黃色。綠色的孔表示終止液未與基質溶液充分混合。

需要的其他材料

1. 酶標儀,包含450nm測定波長,同時包含600-680nm校正波長更佳;

2. 移液器及槍頭;

3. 蒸餾水或去離子水;

4. 100-1000 mL刻度量筒;

5. 洗瓶、排槍或自動微孔板清洗機;

6. 水平軌道微孔板振蕩器,能夠保持500±50 rpm的速度;

7. 用于稀釋標準品和樣品的試管。

注意事項

1. 本試劑盒提供的終止液為稀硫酸溶液,具有一定腐蝕性,應謹慎操作。

2. 本試劑盒中的某些成分含有防腐劑,可能會引起皮膚過敏反應,應佩帶口罩避免吸入薄霧。

3. 顯色劑B可能會引起皮膚、眼睛和呼吸道刺激,應佩帶口罩避免吸入薄霧。

4. 佩戴防護手套、眼睛和面部防護用品,處理后洗手。 

(PABPC1L)檢測試劑盒儲存條件
試劑準備

1. 使用前將所有試劑置于室溫平衡30分鐘左右。

2. 洗滌液/稀釋液配置:如果洗滌液/稀釋液(20×)有晶體析出,需在37℃下加熱?晶體全部溶解。用蒸餾水1: 20稀釋(例如:1mL濃縮洗滌液加入19mL的蒸餾水)

標準品配置

試劑盒中取出標準品,準備7個試管,先從400ng/mL標準品(200μL)按需吸取一定量用1×稀釋液稀釋至20ng/mL(例:50μL的標準品母液+950μL的1×稀釋液,制備得到1000μL的20ng/mL濃度標準品),隨后在6個試管中分別加入500μL的1×稀釋液,在這6個單獨的試管中將20ng/mL標準品依次2倍倍比稀釋至6個梯度,共配制7個濃度的標準品,依次為:  20ng/mL、 10ng/mL、 5ng/mL、 2.5ng/mL、 1.25ng/mL、 0.625ng/mL、 0.313ng/mL,從最高濃度標準品溶液中吸取500μL標準品到下一個試管中,輕輕吹打混勻,以此類推進行標準品的倍比稀釋(如圖所示),1×稀釋液用作零濃度標準品(0ng/mL)。

人(PABPC1L)檢測試劑盒儲存條件


結果的計算

計算標準品和樣本復孔的平均OD值并減去空白孔的OD值作為校正值。以濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出四參數邏輯函數的標準曲線(作圖時去掉空白組的值)或者使用能夠生成四參數邏輯(4-P)曲線擬合的計算機軟件來創建標準曲線。若樣品OD值高于標準曲線上限,應適當稀釋后重測并在計算樣本濃度時乘以相應的稀釋倍數。

示例數據

以下數據和曲線僅供參考,實驗者需根據自己的實驗數據建立標準曲線。

標準品濃度(ng/mL)

20

10

5

2.5

1.25

0.625

0.313

0

OD

2.419

1.618

0.915

0.655

0.493

0.246

0.2

0.072

校正OD

2.347

1.546

0.843

0.583

0.421

0.174

0.128

0

人(PABPC1L)檢測試劑盒儲存條件

本圖所示標準曲線僅供示例,結果計算應以同次試驗標準品所繪標準曲線為準計算樣本結果
靈敏度

經樣本測試,本試劑盒的檢測靈敏度為0.16ng/mL。

特異性

該試劑盒測定可識別重組PABPC1L

其他相關蛋白在稀釋緩沖液中制備為50ng/mL,并測定交叉反應性。沒有觀察到明顯的交叉反應。

實驗步驟匯總 
1. 加標準品及樣品,37℃避光反應1.5h,洗滌3次。

2. 加檢測抗體,37℃避光反應1h,洗滌4次。

3. 加酶結合物,37℃避光反應30分鐘,洗滌4次。

4. 加顯色液,37℃避光反應15分鐘。

5. 加終止液,在5分鐘內讀數

(PABPC1L)ELISA檢測試劑盒用于定量檢測細胞培養上清、血清、血漿中PABPC1L,使用本產品之前,必須完整閱讀本說明書ELISA試劑盒僅供科研使用,不能于其它診斷

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